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糖蛋白染色试剂盒

  • 英文名:Staining Kit for Glycoprotein
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13107510T5400.00元1咨询购买
产品及特点:本产品为在PAGE凝胶或蛋白免疫印记硝酸纤维素膜上检测糖蛋白的试剂盒。该方法使用三种试剂,所需时间仅需不到两小时,而其他的染色方法需要四到五小时。染色后的糖蛋白为品红色条带,背景为浅粉色或者无色。它有如下特点:
1. 一站式,包括一种阳性对照蛋白及一种阴性对照蛋白,用户不要单独配制所需成分,简单快捷。
2. 通过共价修饰方式检测糖基,不检测蛋白部分。
3. 灵敏度一般可以达到微克级别,但实际灵敏度跟靶蛋白糖基化程度相关。
4. 可以用于SDS-PAGE 和2D 电泳的凝胶检测,也可以用于琼脂糖凝胶电泳的检测(但背景较高),还可以用于硝酸纤维素印迹膜的检测。
5. 本产品足够染色10 张mini-PAGE 胶或20 张8×8cm 的蛋白印迹纤维素膜。
试剂盒组成:
氧化试剂: 2.5 g(棕色管)
糖蛋白染色试剂:250 mL(棕色瓶)
还原试剂:1.25 g
阳性对照(辣根过氧化物酶): 1 mg(棕色管)
阴性对照(大豆胰蛋白酶抑制剂) :1 mg(棕色管)
250mL 塑料瓶(空) - 2 个
使用手册: 1 份
使用方法:
1. 配制3%醋酸溶液:将30 mL 自备的冰醋酸与970 mL 超纯水混匀,室温保存备用。
2. 配制50%甲醇溶液:将250 mL 甲醇与250 mL 超纯水混匀,室温保存备用。
3. 配制氧化试剂溶液:将本试剂盒提供的氧化试剂干粉转移到本试剂盒提供的250mL 空塑料瓶中,然后加入250mL 的3%醋酸溶液(第1 步配制),充分混匀溶解后得到氧化试剂溶液,室温保存备用。
4. 配制还原试剂溶液:将本试剂盒提供的还原试剂干粉转移到本试剂盒提供的250mL 空塑料瓶中,然后加入250mL 的超纯水,充分混匀溶解后得到还原试剂溶液,室温保存备用。
5. 配制阳性对照(辣根过氧化物酶)溶液:向装有1 mg 辣根过氧化物酶固体的棕色管中加入1 mL 1×SDS-PAGE 样缓冲液(自备),所得辣根过氧化物酶溶液的浓度即为1mg/mL,然后分装成100uL/管共10管,留下一管当天使用,其余的放-20℃长期保存。对于80 mm×80 mm的凝胶来说,每条泳道加10 μL 的阳性对照溶液即可。
6. 配制阴性对照(大豆胰蛋白酶抑制剂)溶液:向装有1 mg 大豆胰蛋白酶抑制剂干粉的管中加入1×SDS-PAGE 上样缓冲液(自备),所得大豆胰蛋白酶抑制剂溶液的浓度即为1 mg/mL,然后分装成100uL/管共10
管,留下一管当天使用,其余的放-20℃长期保存。对于80 mm×80 mm的凝胶来说,每个泳道加10 μL 的阴性对照溶液即可。
7. 样品稀释:用SDS-PAGE 上样缓冲液将样品浓度稀释为1mg/mL,SDS-PAGE 上样缓冲液终浓度为1×。对于80 mm×80 mm 的凝胶来说,每个泳道加10μL 的样品。
运输及保存:常温运输和保存,但阳性对照和阴性对照干粉需要4℃或更低温度长期保存,有效期一年,但糖蛋白染色试剂的有效期只有半年(从出厂时间开始计算)